黃精丸是由當歸黃精 2 味組成的中成藥，具有補氣養血等功效，用于氣血兩虧，身體虛弱，腰腿無力，倦怠少食。 其中黃精具有補氣養陰，健脾潤肺，延年駐顏之功[1]; 當歸性甘、辛，溫。 歸肝、心、脾經。 為傘形科植物的干燥根，是臨床常用中藥，有活血調經、潤腸止痛之功效[2],當歸含有內酯類、生物堿類、有機酸類或酚類以及中性油類等多種成分[3].在 2010 年版中國藥典一部中，阿魏酸作為當歸質量控制的指標成分。 本文采用 HPLC 的方法測定黃精丸中的阿魏酸含量。
1 儀器、試藥及樣品
Agilent 1200 高效液相色譜儀，Agilent 1260DAD 檢測器，Agilent 1200 Als 自動進樣器，AgilentChemStation 工作站； 分析天平（ 北京 Sartorious 儀器有限公司） ; KQ-500 型超聲波清洗器（ 昆山超聲儀器有限公司） .
對照品阿魏酸（ 批號 110773-201012） 購買于中國食品藥品檢定研究院，水為超純水，乙腈為 HPLC級（ 賽默飛世爾科技有限公司） ,磷酸為分析純（ 北京化工廠） .
黃 精 丸 3 批 （ 批 號： 13010113、13010114、13010115） 市售。
2 溶液的配制
2. 1 對照品溶液
精 密 稱 取 含 量 為 99. 6% 阿 魏 酸 對 照 品12. 90 mg,置 1 000 mL 容量瓶中，加甲醇適量使其溶解 并 稀 釋 至 刻 度，搖 勻，作 為 對 照 品 溶 液（ 0. 0129 mg·mL- 1） .
2. 2 供試品溶液
取本品大蜜丸，剪碎，取 0. 4 g,精密稱定，加等量的硅藻土研碎，過 40 目篩，混合均勻，置圓底燒瓶中，精密加 70% 甲醇 20 mL,稱定重量，加熱回流30 min,放冷，再稱定重量，用 70% 甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液濾過，取續濾液，用微孔濾膜（ 0. 45 μm） 濾過，取續濾液，即得。
2. 3 陰性樣品溶液
按處方配比，取除當歸的黃精藥材，粉碎成細粉，過 40 目篩，按“2. 2”項下方法配制出對照品溶液。
3 色譜條件
色譜柱： Aglient TC-C18 （ 4. 6 mm × 250 mm,5 μm） 分析柱； 流動相： 以乙腈-0. 085% 磷酸溶液（ 20∶ 80） ; 檢測波長 316 nm; 柱溫 35 ℃； 流速流速1. 0 mL·min- 1; 進樣量： 10 μL.
在上述色譜條件下，精密吸取供試品溶液、對照品溶液、陰性樣品溶液各 10μL,分別注入色譜儀，結果表明樣品中其他成分對阿魏酸的測定無干擾，見圖 1.
4 方法學考察
4. 1 線性關系的考察
分別吸取 0. 0129 mg·mL- 1對照品溶液 1,3,5,7,9 μL,注入液相色譜儀，以進樣量 （ μg） 對色譜峰面積積分值（ Y） 作標準曲線，并進行回歸，計算得回歸方程為：
Y = 3 173. 381 395X - 0. 286 500 r = 0. 999 998結果表明阿魏酸進樣量在 0. 0129 μg ~ 0. 1161 μg的范圍內峰面積呈良好線性關系。
4. 2 穩定性試驗
精密 稱 取 黃 精 丸 供 試 品 （ 批 號 13010113）0. 400 9 g,照“2. 2”項下方法，分別在 0、1、3、5、8、12、24 h 進樣測定，以峰面積計算，阿魏酸峰面積的 RSD 為 0. 99% ,結果表明黃精丸自制備在 24 h內穩定。
4. 3 精密度試驗
取同一批號的黃精丸樣品（ 批號 13010113） 1份，按“2. 2”項下方法制備和測定，含量測定方法按擬定的色譜條件連續進樣 6 次，以峰面積計算，RSD為 0. 56%,小于 3%,精密度良好。
4. 4 重復性試驗
取同一批號的黃精丸樣品（ 批號 13010113）6 份，按“2. 2”項下方法制備和測定，含量測定方法按擬定的色譜條件進行測定，測得阿魏酸的平均含量 （ n = 6） 為 2. 3121 mg·丸- 1,RSD 為 0. 19%,結果表明重復性良好。
4. 5 加樣回收率試驗稱取已知含量的同一批黃精丸樣品 （ 批號13010113,阿魏酸含量為 0. 255 3 mg·g- 1） 6 份，每份約 0. 2 g 精密稱取，分別精密加入阿魏酸對照品溶液 56. 55 μg,按正文供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，按正文色譜條件測定其含量，結果平均回收率（ n = 6） 為 99. 96%,RSD 為 2. 70%,表明本實驗具有良好的回收率。
5 樣品含量測定
精密稱取黃精丸樣品 3 批，每批兩份，按“2. 2”項下方法制備供試溶液，按擬定的色譜條件進行測定。 按外標法計算阿魏酸的含量，結果見表 1.
6 討 論
不同的提取方法，溶劑及提取時間對實驗結果有著較大影響。 本實驗對不同的提取方法（ 超聲提取、回流提?。?、提取時間（ 20 min、30 min、40 min）及溶劑（ 100% 甲醇、70% 甲醇） 進行了考察，實驗結果顯示，回流加熱提取率高，70% 甲醇比 100% 甲醇提取的含量要高，回流加熱提取30 min,40 min 的含量比回流加熱提取 20 min 的含量高，但回流加熱提取 30 min 與 40 min,信號已無差別，所以提取工藝選擇回流加熱時間為 30 min,提取溶劑為 70%甲醇。
采用中國藥典方法以乙腈-0. 085% 磷酸溶液（ 20∶ 80） 為流動相對阿魏酸進行 HPLC 法測定，分離較好，基線較低，節省了時間與溶劑，保持了柱效的穩定性，分離較理想。
本法用 HPLC 法測定黃精丸中阿魏酸，樣品處理方法簡單，穩定，重復性良好，可用于黃精丸藥丸的質量控制。
參 考 文 獻
[1] 魏憲純，李明杰，張春蕾。 九轉黃精丸對衰老小鼠皮膚及血清中脂褐質含量影響的研究[J]. 中醫藥信息，2009,26（ 6） : 51 - 52.
[2] 國家藥典委員會。 中華人民共和國藥典[M ]. 第一部。 北京： 中國醫學科技出版社，2010: 124.
[3] 楊帆，肖遠勝，章飛芳，等。 當歸化學成分的 HPLC-MS/MS 分析[J]. 藥學學報，2006,41（ 11） : 1078 -1083.
