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首頁 > 化學論文 > > 食用油中甘油三酯的分離分析化學方法
食用油中甘油三酯的分離分析化學方法
>2024-05-22 09:00:00



1 引 言

三脂肪酸甘油酯( 甘油三酯) 由 1 個甘油分子與 3 個脂肪酸分子結合成酯而成,是食用油的主要成分。根據碳鏈的長度以及不飽和度,脂肪酸的種類可高達 800 余種。動物及植物油脂主要集中在含有0 ~ 3 個雙鍵的 C8~ C26的直鏈脂肪酸,同時由于結合位置的不固定,導致了甘油三酯的種類相較脂肪酸更趨向于復雜多樣[1].但常見動物油和植物油中主要存在的僅是含有 C16和 C18的甘油三酯,如脂肪酸為棕櫚酸( C16∶ 0,P) 、硬脂酸( C18∶ 0,S) 、油酸( C18∶ 1,O) 、亞油酸( C18∶ 2,L) 、亞麻酸( C18∶ 3,Ln) 的甘油三酯。其它脂肪酸的甘油三酯含量普遍較低。

目前,在世界范圍內廣泛存在著食用油摻雜的問題,在中國尤以地溝油摻雜問題備受關注[2 ~4],甘油三酯作為食用油的主要成分,對其進行分離分析是一個值得關注的研究方向。高效液相色譜-質譜聯用技術( LC-MS) 在分離分析甘油三酯方面具有獨特的優勢,不同的液相色譜柱可以對甘油三酯形成不同程度的分離,高靈敏質譜檢測器為分離后的定性識別與定量分析提供了重要條件。目前,用于分析甘油三酯的質譜離子源有 ESI 與 APCI 兩種離子源。ESI 源適用于檢測中等極性以及強極性的化合物,在使用 ESI 源時可利用多級質譜通過將甘油三酯分子打碎后得到的子離子峰,獲得對甘油三酯更好的定性分析結果[5,6].通常使用 ESI 源時需要在流動相中加入鹽類才會有好的離子化效果[7 ~9].APCI 源適用于弱極性化合物的檢測,甘油三酯在 APCI 源中主要形成 3 種類型的碎片離子: ?;x子( RCO)+、單?;视碗x子( M + H - RCOOH - RCO)+和二?;视碗x子( M + H - RCOOH)+,根據這些碎片離子峰的特征,可以確定甘油三酯的結構[10 ~13].

本實驗使用串聯長柱建立了超高效液相色譜-質譜聯用( UPLC-MS) 分析食用油中甘油三酯組成的方法。與普通的 HPLC 分離相比,本方法可以簡便地對食用油中的甘油三酯實現更精細的分離分析,從而可根據不同食用油之間甘油三酯的精細差異,區分常見食用油,并可檢測摻入少量豬油的大豆油。

2 實驗部分

2. 1 儀器與試劑

LCMS 2020 型超高效液相色譜儀( 日本 島津公司) ,包括脫氣機、兩個 LC-30AD 泵、CTO-30A 柱溫箱、SIL-30AC 自動進樣器、SPD-M20A 二極管陣列檢測器及使用 APCI 源的質譜檢測器。數據分析軟件采用 LabSolution software ( version 5. 53) .三油酸甘油三酯、乙腈( HPLC 級) 、異丙醇( HPLC 級) 均購自國藥集團化學試劑有限公司。食用油樣品除豬油為自制外,其它均購自本地超市。

2. 2 實驗方法

2. 2. 1 樣品及其準備 ( 1) 液體樣品 移取 10 μL 樣品溶于 1000 μL 異丙醇中,濃度為 1% ( V /V) ,直接進樣。( 2) 固體樣品 稱取 0. 5 g 溶解于 50 mL 正己烷中,濃度為 1%( w/V) ,直接進樣。

2. 2. 2 色譜與質譜條件 液相色譜條件: Thermo Syncronis C18色譜柱( 100 mm ×2. 1 mm,1. 7 μm) 與兩根月旭 Ultimate UHPLC XB-C18( 150 mm ×2. 1 mm,1. 8 μm) 色譜柱串聯。流速為 0. 2 mL/min,流動相為乙腈-異丙醇( 50∶ 50,V/V) 等度洗脫。進樣量為 1 μL.質譜條件: APCI 電離源,正離子電離模式,質荷比( m/z) 范圍300 ~1050,霧化氣流速2. 5 L/min,干燥氣流速 5 L/min,APCI 溫度 250℃,DL 溫度 250℃,Heat 溫度 200℃,檢測器電壓 1. 05 kV.

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