紅花活絡酒為貴州民間治療跌打損傷引起的各種疼痛的驗方，方中主要由續斷、紅花、靈芝、蟲草等中藥組成，具有活血祛瘀、消腫止痛的功效。本實驗對該制劑進行薄層鑒別，用以控制其質量。
1 儀器與試藥
ZF 型薄層三用紫外分析儀（ 上海將來實驗設備有限公司） ,硅膠 G、H、GF254 板（ 青島海洋化工有限公司） .
續斷、紅花、靈芝、蟲草對照藥材（ 均購自中國食品藥品檢定 研 究 院，批 號 分 別 為： 121033 - 201110,120907 -201111,120968 - 201107,121201 - 200502） ,其余試劑均為分析純。
2 方法與結果
2. 1 靈芝
取本品 25 ml,蒸干，殘渣加乙醇 30 ml 溶解，超聲處理10 min,濾過，濾液濃縮至 5 ml,過中性氧化鋁柱（ 100 ~ 200目，2 g,內徑 1. 5 cm） ,用乙醇洗至無色，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇 2 ml 溶解，作為供試品溶液。另取靈芝對照藥材 1 g,加乙醇 30 ml,超聲提取 30 min,濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇 2 ml 溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各 2 μl,分別點于同一塊硅膠 G 板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲酸（ 10∶ 5∶ 1） 的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（ 365 nm） 下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。陰性對照色譜無干擾。
2. 2 蟲草
取本品 50 ml,蒸干，殘渣加乙醇 50 ml 溶解，超聲處理10 min,濾過，濾液濃縮至 5 ml,蒸干，殘渣用甲醇 2 ml 溶解，作為供試品溶液。另取冬蟲夏草蟲草對照藥材 1 g,加乙醇30 ml,超聲提取 30 min,濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇 2 ml 使其溶解，作為對照藥材溶液。以氯仿-乙酸乙酯-異丙醇-水-氨水（ 8∶ 2∶ 6∶ 0. 4 -0. 8∶ 0. 12） 為展開系統[1],硅膠GF254 板展開，并在 254 nm 紫外光燈下檢視。結果，在展開劑的頂點供試品溶液與對照藥材溶液相應位置處隱約有對應的斑點。但經反復試驗后發現，該方法的重新性差，達不到薄層鑒別的效果。
2. 3 續斷
按照 2010 版藥典中續斷的薄層鑒別方法，對制劑中的續斷進行研究。供試品色譜在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上無對應斑點。后經改變展開劑的比例及提取方法均無對應的斑點。查閱相關文獻，采用乙酸乙酯-甲醇-甲酸（ 5∶ 2∶ 1）[2]、正丁醇-乙酸乙酯-稀氨水（ 4∶ 1∶ 5,上層溶液）[3]等為展開系統，經反復摸索，供試品色譜在與對照藥材及川續斷皂苷Ⅵ對照品色譜相應的位置上無對應的斑點。
2. 4 紅花
按照 2010 版藥典中紅花的薄層鑒別方法，以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇（ 7∶ 2∶ 3∶ 0. 4）[4]為展開劑，在硅膠H 板上進行展開，結果，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置無對應的斑點，因此，又參考了大量文獻，以乙酸乙酯、水飽和正丁醇等為提取溶劑，分別以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（ 5∶ 4∶ 1）[5]、乙酸乙酯[6]等溶劑系統為展開劑進行展開。經反復摸索，薄層層析的效果均不理想。之后又采用 AB -8 大孔吸附樹脂對樣品進行純化，但供試品色譜在與紅花對照藥材色譜相應的位置無對應的斑點。
3 結論與討論
采用以上方法對紅花活絡酒進行了薄層鑒別，其中靈芝薄層斑點清晰，重現性好，為該制劑質量標準的制定提供了參考。蟲草、續斷、紅花經反復試驗，均得不到理想結果，故不再考慮將其薄層列入質量標準。
靈芝薄層鑒別中，經參考文獻采用了石油醚-甲酸乙酯-甲酸（ 15∶ 5∶ 1,）[7]、環己烷-甲酸乙酯-甲酸（ 15∶ 5∶ 1）[8]、石油醚-乙酸乙酯-甲酸（ 6∶ 4∶ 0. 5）[9]分離效果均不明顯，重現性差。
紅花活絡酒組方較復雜，采用單一化學對照品難以鑒別，因此以上 4 味藥均采用其對照藥材做參照，其中靈芝的薄層鑒別專屬性強，重現性好，能夠用于該制劑的質量控制。
參考文獻：
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