和胃平肝丸是舒氣平肝，和胃止痛的良方。 用于肝胃不和，氣郁結滯引起的兩脅脹滿，倒飽嘈雜，氣逆作嘔，胃脘刺痛，飲食無味。 芍藥苷是其組成藥物白芍的有效成分之一，具有顯著的鎮痛、鎮靜、抗驚厥作用。 本研究采用高效液相色譜法（HPLC）對制劑中芍藥苷含量進行測定。 實驗證明該法準確、快捷、靈敏、重現性好。
1 儀器與試藥
Waters 600-717-2996 高效液相色譜儀（ 自動進樣器，PDA 檢測器；Empower 色譜工作站）；芍藥苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號 110736-200630）；和胃平肝丸為市售藥物；乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純，水為超純水。
2 方法與結果
2. 1 色譜條件Eclipse XDB-C18 色譜柱 （ 4. 6 mm × 150 mm,5 μm），以乙腈-水（11 ∶ 89） 為流動相，檢測波長232 nm,流速 1. 0 mL·min- 1,柱溫 30 ℃，進樣量20 μL.
2. 2 對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品 1. 50 mg 于25 mL 容量瓶中，加甲醇使溶解制成每 1 mL 含 0. 060 mg 的溶液，作為對照品儲備液。
2. 3 陰性對照品溶液的制備按處方量稱取除白芍外的藥材，置具塞錐形瓶中，精密加 70% 乙醇 50 mL,密塞，稱定重量，超聲30 min,放冷，密塞，再稱定重量，用 70% 乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，過 0. 45 μm 有機微孔濾膜，作為陰性對照品溶液。
2. 4 供試品溶液的制備取重量差異項下的本品，剪碎，混勻，取約0. 5 g,精密稱定，加入硅藻土 0. 5 g,研勻，置具塞錐形瓶中，精密加 70% 乙醇 50 mL,密塞，稱定重量，超聲 30 min,放冷，密塞，再稱定重量，用 70% 乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，過 0. 45 μm有機微孔濾膜，作為供試品溶液。
2. 5 系統適用性試驗及專屬性考察精密吸取對照品溶液、供試品溶液及空白對照品溶液各 20 μL,分別按照上述色譜條件進樣，色譜圖見圖 1. 理論塔板數按芍藥苷峰計算不低于2 000,芍藥苷峰與相鄰色譜峰的分離度均大于 1. 5.
2. 6 線性關系考察分別精密吸取對照品儲備液 2,4,6,8,10μL 進樣測定，記錄色譜圖。 以進樣量（X,μg）對色譜峰面積積分值（Y）作標準曲線，并進行回歸，計算得回歸方程為：Y =1 432 113X -6 744,r =0. 999 9,線性范圍 0. 12 ~ 0. 60 μg.
2. 7 穩定性試驗取同一批樣品的供試品溶液，分別在 0,1,3,5,8,12,18,24 h 進行 HPLC 測定，記錄峰面積積分值。芍藥苷峰面積積分值 RSD 為 1. 59%.
2. 8 精密度試驗取同一批號的和胃平肝丸供試品 0. 5 g,按 2. 4項下方法制備供試品溶液，按擬定的色譜條件連續進樣 6 次，測定芍藥苷峰面積，計算 RSD 為 0. 74%.
2. 9 重復性試驗精密稱取同批樣品 6 份，按 2. 4 項下方法制備供試品溶液，按擬定的色譜條件進行測定。 測得芍藥苷的平均含量（n = 6）為 0. 761 2 mg·g- 1,RSD 為2. 09% .
2. 10 加樣回收率試驗取已知含量（0. 761 2 mg·g- 1） 的同批樣品6 份，每份約 0. 25 g,精密稱定，分別精密加入芍藥苷對照品180 μg,按2. 4 項下方法制備供試品溶液，按擬定的色譜條件進行測定。 結果平均回收率（n =6）為 99. 41%,RSD 為 1. 79%.
2. 11 樣品含量測定精密稱取 3 批和胃平肝丸樣品，每批 2 份，分別按 2. 4 項下方法制備供試品溶液，按擬定的色譜條件進行測定，按照外標法計算芍藥苷含量。 結果見表 1.【1】
3 討 論
3. 1 檢測波長的選擇對芍藥苷對照品溶液在 190 ~400 nm 內做了紫外掃描，芍藥苷在 232 nm 處有強吸收峰，因此選擇232 nm 為檢測波長。
3. 2 流動相的選擇考察了不同比例的乙腈-水的流動相系統，結果表明，采用乙腈-水（11∶ 89）作流動相時出峰時間較快，峰型較好。
3. 3 提取方法的選擇采用 70%乙醇為提取溶劑，考察了超聲提取和回流提取 2 種方法，結果表明，超聲提取比回流提取方法提取完全，因此采用了超聲提取方法。
3. 4 提取溶劑的選擇采用超聲的提取方法，考察了 100% 乙醇，70%甲醇，70%乙醇的提取效果，結果表明，70% 乙醇提取效率最高，因此選擇了 70%乙醇為提取溶劑。
3. 5 提取時間的選擇分別考察了超聲 20 min,30 min,40 min 的提取效果，結果表明，超聲 30 min 與超聲 40 min 提取效率無明顯差別，說明超聲 30 min 已經能夠提取完全，因此選擇了超聲 30 min.
參 考 文 獻
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