摘 要：目的：建立復方對乙酰氨基酚片中乙酰水楊酸、對乙酰氨基酚以及咖啡因含量的具體檢測方法。方法：在測定的過程中采用高效液相色譜儀，將C18當做色譜柱，將PH值為3.0的0.05M磷酸二氫鉀-配比為75：25的甲醇當做流動相，檢測的波長為254nm，同時在測定的過程中還要采用外標法進行測定。結果：在對3種成分進行檢測之后發現，其具有非常好的線形關系，此外，在分離度方面也完全符合檢測的要求。結論：采用高效液相色譜法對復方對乙酰氨基酚片的含量進行測定操作非常的簡單，同時測定的結果精確性強，所以也可以將其當做復方對乙酰氨基酚片的基本檢驗方法。
關鍵詞：復方對乙酰氨基酚片；HPLC法；含量測定
復方對乙酰氨基酚片是一種臨床上比較常用的解熱鎮痛的藥物，它在應用的過程中療效非常好，同時在使用的時候也不會產生非常明顯的副作用，所以在這種藥物也得到了非常廣泛的應用，相關標準的含量測定當中采用容量法、中和法、重氮化法以及氧化還原的方法對3種主要的成分進行測定處理在測定的時候，不同的組分之間可以形成良好的玻璃管理，同時還具備良好的線形關系，這種方法比較簡單，準確性也比較強，所以也比較適合應用在本品的質量控制工作中。
1、儀器藥品及試劑
SP8810液相色譜儀，CC100紫外可見光檢測器，SP4270積分儀。對乙酞氨基酚對照品由中國藥品生物檢定所提供，乙酞水楊酸（含量99.8%），咖啡因（99.6%），以及樣品均由赤峰永巨制藥廠提供，甲醇、磷酸二氫鉀為分析純。
2、色譜條件
流動相：0.05M磷酸二氫鉀（磷酸調pH3.0）一甲醇（75：25），流速0.8ml/min，檢測波長254nm，靈敏度0.1，室溫，進樣量10μl。
3、實驗方法
線形關系：精確稱取乙酰水楊酸對照品25mg，對乙酰氨基酚對照品12mg，將其放置在容積為50ml的容量瓶當中。加入35ml的流動相，同時采用超聲的方式使其充分的溶解。還要精確的稱取咖啡因對照品15mg，將其放置在容積為50ml的容量瓶當中，加入流動至刻度的位置。精確量取上述對照品溶液10ml，加入適量的流動相使其到達刻度，分別取上述對照品溶液3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5ml，將其放置在容積為10ml的容量瓶當中，使用流動相將其稀釋到刻度的位置，之后進行搖勻處理，取出上述10μl上述的溶液，注入HPLC，將峰面積當做縱坐標，將濃度當做橫坐標開展直線方程回歸分析，如表1、表2、表3所示：
回歸啦試驗：用藥用天平精確的稱取適量的對照品，將其配制成3批濃度完全不同的溶液，同時還要按照配方的要求加入輔料，將其制成試液，在過濾之后，每一種濃度都要取出3份進樣，其容積為10μl，之后對平均回收率進行計算。
重現性試驗：取線性關系實驗的溶液5―10ml，將其連續進樣5次，得出對乙酰氨基酚的RSD為0.59%，乙酰水楊酸的RSD為0.88%，咖啡因的RSD為0.71%。
穩定性試驗：精確的量取上述重現性試驗當中所使用的溶液，將其分別放置2、4、6、8小時，4個時間間隔對其進行實驗，在實驗中發現隨著時間的推移，峰面積的變化并不是十分的明顯。
干擾性試驗：精確稱取輔料適量，將其按照處方的比例配置成輔料溶液，將其進行過濾處理，取出10μl的過濾液，將其注入色譜儀中，對色譜圖進行記錄，40分鐘之內沒有出現吸收峰。
有關物質測定：根據部頒標準有關物質對游稗水楊酸檢查限度，可取一定量的水楊酸對照溶液是行峰面積比較。其樣品溶液在咖啡因峰前能分離水楊酸，分離度大于2。
樣品測定：取出10片本品，對其進行稱定，同時還要進行研細處理，，稱取適量的樣品，加入流動相，流動相的容積為70ml，采用超聲溶解的方式加以處理，之后加入流動相，最終的容積為100ml，將其搖勻和過濾處理，取出5ml的濾液，加入流動相至10ml，將其當做樣品溶液。
另取對照品對乙酞氨基酚12.6mg，乙酞水楊酸23mg，置100m1容量瓶中，加流動相70m1，振搖溶解。另取咖啡因15mg置50m1容量瓶中，加流動相溶解成50m1，搖勻，精密量取該溶液l0l加到上述100m1容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。精密量取該溶液5m1，加流動相稀釋至l0ml，作為對照品溶液。分別取供試品、對照品溶液各10ml注入液相色譜儀，外標法計算含量。
取某藥廠生產的復方對乙酞氨基酚片，分別用部頒標準和新建立標準檢驗，其含量測定結果為部頒方法：乙酞水楊酸98.6%，對乙酞氨基酚97.4%，咖啡因100.096%HPLC法：乙酞水楊酸98.9%，對乙酞氨基酚97.8%，咖啡因100.1%。
4討論
高效液相色譜分析的流程。由泵將儲液瓶中的溶劑吸入色譜系統，然后輸出，經流量與壓力測量之后，導入進樣器。被測物由進樣器注入，并隨流動相通過色譜柱，在柱上進行分離后進入檢測器，檢測信號由數據處理設備采集與處理，并記錄色譜圖。廢液流入廢液瓶。遇到復雜的混合物分離（極性范圍比較寬）還可用梯度控制器作梯度洗脫。這和氣相色譜的程序升溫類似，不同的是氣相色譜改變溫度，而HPLC改變的是流動相極性，使樣品各組分在最佳條件下得以分離。
高效液相色譜的分離過程。開始樣品加在柱頭上，假設樣品中含有3個組分，A、B和C，隨流動相一起進入色譜柱，開始在固定相和流動相之間進行分配。分配系數小的組分A不易被固定相阻留，較早地流出色譜柱。分配系數大的組分C在固定相上滯留時間長，較晚流出色譜柱。組分B的分配系數介于A，C之間，第二個流出色譜柱。若一個含有多個組分的混合物進入系統，則混合物中各組分按其在兩相間分配系數的不同先后流出色譜柱，達到分離之目的。
不同組分在色譜過程中的分離情況，首先取決于各組分在兩相間的分配系數、吸附能力、親和力等是否有差異，這是熱力學平衡問題，也是分離的首要條件。其次，當不同組分在色譜柱中運動時，譜帶隨柱長展寬，分離情況與兩相之間的擴散系數、固定相粒度的大小、柱的填充情況以及流動相的流速等有關。所以分離最終效果則是熱力學與動力學兩方面的綜合效益。
經過以上試驗證明，該方法能夠準確測定其各成分含量，與部頒法無顯著差別。此方法可靠，快速方便，操作簡單，結果穩定，同時也提高了分析結果的準確性和重現性。
參考文獻：
[1]付宏慧.對乙酰氨基酚片微生物限度檢查法方法的驗證[J].黑龍江科技信息.2009（14）
[2]石向群，方莉，徐秀景，魏山青，張揚.液相色譜法測定對乙酰氨基酚片的含量[J].廣州化工.2012（01）
[3]楊寶翠，劉鳳武，屈云萍.復方對乙酰氨基酚片制粒工藝研究[J].臨床合理用藥雜志.2013（07）
