茄子 （Solanum melongena L.） 是一種重要的蔬菜，在我國栽種面積達 20 余萬 hm2。 近年來，茄子病害日益嚴重，其中茄子枯萎?。‵usarium oxysporum f.sp.melongenae Matuo et lshigami Schlecht.） 是一種常見的土傳性病害，可引起維管束病變，造成植株死亡，使病田減產 20％~30％，嚴重時高達 50％~60％，甚至絕產。 生產綠色有機蔬菜時，防治病害應主要采用生物防治方式，以減少農藥對環境和人畜的危害，防止病原菌產生抗藥性及再泛濫。 細辛 （Asarum het-erotropoides Fr. Schmidt var.Mandshuricum （Maxrm）Kitag.） 屬常用中草藥， 其活性物質主要為揮發油精油。 王桂清等的研究表明，細辛精油具有廣譜抑菌活性，對玉米、黃瓜、果樹、棉花、木本花卉等多種植物病害致病菌具有抑制作用。以茄子枯萎病菌為靶標病原菌、細辛精油為研究對象、3 種化學藥劑為對照，研究細辛精油和化學藥劑對茄子枯萎病菌菌絲生長和孢子萌發的抑菌效果，為將細辛精油開發成植物源殺菌劑提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試菌種

茄子枯萎病菌來源于聊城大學農學院病理實驗室。 該病原真菌病樣采集于聊城市許營村蔬菜大棚，經分離、純化、鑒定后保存備用。

1.2 供試制劑

細辛精油采用超臨界 CO2萃取法獲得，密封保存于 4 ℃冰箱中。惡霉靈 70%可濕性粉劑（WP）由山東煙臺鑫潤精細化工有限公司生產；撲海因 500 g /L 懸浮劑（SC，有效成分通用名稱為異菌脲）由拜耳杭州作物科學有限公司生產；嘧霉胺 30%懸浮劑（SC）由山東京博農化有限公司生產。

1.3 制劑配制

1） 菌絲生長抑制液： 用少量二甲基亞砜溶解細辛精油（不超過總體積的 2％），然后用無菌水配制成10 000 mg/L 的 母液 ，采用二倍稀釋法配成 10 000，5 000，2 500，1 250，625 mg/L 等 5 個 濃 度 梯 度 ；3 種 化 學 藥 劑 分 別 用 無 菌 水 配 制 成 2 000，1 000，500，250，125 mg/L 等 5 個濃度梯度。

2） 孢 子萌發抑制液 ： 細辛精油的配制方法同1）；3 種 化學藥劑的 5 個 濃度梯度為 1 000.0，500.0，250.0，125.0，62.5 mg/L。

1.4 生物測定方法

1） 生長速率法。 采用生長速率法測定細辛精油和 3 種化學藥劑對茄子枯萎病菌菌絲生長的抑制作用，培養基為含藥 PDA，空白對照不加藥，3 次重復。細辛精油終濃度為 1 000.0，500.0，250.0，125.0，62.5mg/L，3 種 化 學 藥 劑 終 濃 度 分 別 為 200.0，100.0，50.0，25.0，12.5 mg/L。

2） 孢子萌發法。 采用孢子萌發法測定細辛精油和 3 種化學藥劑對茄子枯萎病菌孢子萌發的抑制作用，3 次重復。 細辛精油終濃度為 1 000.0，500.0，250.0，125.0，62.5 mg/L，3 種化學藥劑終濃度 分別為100.00，50.00，25.00，12.50，6.25 mg/L。

1.5 數據處理及毒力回歸曲線建立

應用 Microsoft Excel 軟件處理數據； 采用 SPSS10.0 軟件建立毒力回歸曲線，將抑菌的百分率轉換成幾率值，濃度轉換成對數，進行幾率值分析，分別求出細辛精油和 3 種化學藥劑的抑制中濃度（EC50）；利用DPS v7.05 專業版軟件，依據 Duncar 新復極差法進行差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 細辛精油對菌絲生長的抑制作用

供試條件下，細辛精油和 3 種化學農藥對茄子枯萎病菌菌絲生長的抑制效果見表 1 和表 2。

由表 1 和表 2 可以看出：細辛精油和 3 種化學農藥對茄子枯萎病菌菌絲生長均有抑制作用，且隨著制劑濃度的升高，抑制率逐漸增加；相同濃度條件下，不同藥劑對菌絲生長的抑制效果不同； 當濃度≤100mg/L 時，嘧霉胺、撲海因和惡霉靈三者的抑菌效果差異性顯著，其中撲海因的效果最佳，當濃度為 50 mg/L時，其抑菌率超過了 50％；濃度為 200 mg/L 時，撲海因和嘧霉胺的抑菌效果差異性不顯著，抑菌率分別為86.42％ 和 88.01％ ； 當 細辛精油濃度為 1 000 mg/L時，其對菌絲生長的抑制率達到 61.48％。

由表 2 可以看出：細辛精油和 3 種化學農藥對茄子枯萎病菌菌絲生長的抑制效果存在差異，3 種化學農藥中撲海因的抑制效果最佳，EC50和 EC90分別為41.08 mg/L 和 155.76 mg/L；嘧霉胺次之，EC50和 EC90分別為 58.30 mg/L 和 216.25 mg/L； 惡霉靈的效果較差，EC50為 827.07 mg/L，EC90達到了 18 146.34 mg/L；細 辛 精 油 的 EC50為 1 009.72 mg/L， 而 其 EC90（6 962.07 mg/L）低于惡霉靈的 EC90（18 146.34 mg/L），說明細辛精油在較高濃度時的抑菌效果優于惡霉靈。

2.2 細辛精油對孢子萌發的抑制作用

細辛精油和 3 種化學農藥對枯萎病菌孢子萌發的抑制效果如表 3—5 所示。

由表 3 和表 4 可以看出：細辛精油和 3 種化學農藥對枯萎病菌孢子萌發的抑制效果隨著藥劑濃度的升高而增強；相同濃度條件下，不同藥劑對枯萎病菌孢子萌發的抑制效果存在差異， 當化學農藥濃度≤25.0 mg/L 時，撲海因、嘧霉胺和惡霉靈 3 種藥劑之間抑菌效果差異不顯著，但當濃度≥50.0 mg/L 時，3 者之間則差異極顯著；3 種化學農藥之中撲海因的抑菌效果最佳， 惡霉靈的抑菌效果最差， 當濃度為 100.0mg/L 時，前者的抑菌率（90.13 ％）是后者（7.18 ％）的12.55 倍。 細辛精油作為一種植物提取物， 當濃度為500 mg/L 時，其對孢子萌發的抑制率達到 84.63％，抑菌效果非常顯著。

由表 5 可以看出：細辛精油和 3 種化學農藥對茄子枯萎病菌孢子萌發的抑制效果差異較大：3 種化學農藥中撲海因的抑菌效果最佳，EC50和 EC90分別為42.05 mg/L 和 133.50 mg/L；嘧霉胺次之，EC50和 EC90分別為 71.64 mg/L 和 221.47 mg/L； 而惡霉靈的抑制效 果 較 差 ，EC50和 EC90分 別 為 7 243.56 mg/L 和315 212.95 mg/L； 細 辛精油的 EC50和 EC90分別為348.99 mg/L 和 776.99 mg/L， 與惡霉靈比較，EC50提高了 95.18％，EC90提高了 99.75％， 說明細辛精油對茄子枯萎病菌孢子萌發的抑菌效果明顯，遠優于惡霉靈。

總體而言，細辛精油對孢子萌發的抑制效果優于對菌絲生長的抑制效果，EC50分別為 348.99 mg/L 和1 009.72 mg/L；3 種化學農藥中撲海因對枯萎病菌菌絲生長和孢子萌發的抑制效果最佳，EC50分別為41.08 mg/L 和 42.05 mg/L， 惡霉靈的抑制效果較差，EC50分別為 827.07 mg/L 和 7243.56 mg/L， 分別為撲海因的 20.13 倍和 172.26 倍， 為細辛精油的 0.82 倍和 20.76 倍；從 EC90上看，細辛精油的抑菌效果比惡霉靈提高了 61.63%（菌絲生長） 和 99.75 ％（孢子萌發）。

3 結論與討論

采用生長速率法和孢子萌發法分別測定細辛精油和 3 種化學農藥（70%惡霉靈 WP、撲海因 SC、30%嘧霉胺 SC） 對茄子枯萎病菌菌絲生長和孢子萌發的抑菌效果。 結果表明：細辛精油對菌絲生長和孢子萌發的 EC50分別為 1 009.72 mg/L 和 348.99 mg/L，其對孢子萌發的抑制效果明顯優于對菌絲生長的抑制作用，說明細辛精油作為植物提取物對茄子枯萎病菌的主要作用方式為抑制孢子萌發，使其不能增殖，從根本上滅殺病原菌；從 EC90上看，細辛精油的抑菌效果比惡霉靈高 61.63％（菌絲生長） 和 99.75 ％（孢子萌發）， 說明細辛精油在較高濃度時的抑菌效果優于惡霉靈?？菸∈寝r作物、果蔬、花卉、苗木等的常見病害，使寄主植物長勢減弱或死亡，導致減產甚至絕產。

生物防治不僅能夠有效控制病害的發生和危害，而且能夠提高產品產量和質量，減少對環境的污染和對人畜的危害。 開發新的生防農藥尤其是植物源農藥，已成為植保界和化工界的研究新熱點。郭新春的研究發現，小茴香\\(Fructus Foeniculi）提取物對棉花枯萎病菌\\(F. oxysporum f. sp.）有較強的抑菌活性，當濃度為 0.1 g/mL 時抑菌率達到 100％。 王磊等的研究表明：木香\\(Auck-landia lappa Decne）、丁香\\(Syzygium aromaticum）、 肉 桂\\(Cinnamomum cassia） 和 大 黃 \\(Rheum palmatum） 這 4種植物的提取物對黃瓜枯萎病菌（F. oxysporium f. sp.cucumerinum） 和西瓜枯萎病菌 （F. oxysporum f. sp.Niveum）均有明顯的抑制作用，當 4 種植物提取物濃度均為 25 mg/mL 時，木香、丁香和肉桂的提取物對黃瓜枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的菌絲生長抑制率均達到 90％左右， 大黃提取物對兩者菌絲生長的抑制率分別為 54.5％和 67.2％。 范志宏等的研究表明，萬壽菊\\(Tagetes erecta L.）精油殺菌素對西瓜枯萎病菌有較強的抑制作用，當其濃度達到 1.5 μg/mL 時，抑制率達到 100％。 王樹桐等發現丁香等十幾種中草藥提取物對香蕉枯萎病菌\\(F. oxysporum f. sp.）有一定的抑制作用，其中丁香提取物抑菌效果最好，對菌株 B1和菌株 B2的抑制濃度分別為 3.40 mg/mL 和 3.38 mg/mL。 王桂清采用細辛精油處理黃瓜枯萎病菌，發現當細辛精油濃度為 1 200 mg/L 時， 對黃瓜枯萎病菌絲生長和孢子萌發的抑制率分別為 85％和 75％，EC50分別為 314.12 mg/L 和 860.43 mg/L。 以上研究說明，利用植物提取物防治枯萎病是可行的。本研究結果也表明： 細辛精油對茄子枯萎病菌有明顯的抑制效果。在實踐生產中，細辛精油可以作為一種植物源殺菌劑來替代化學農藥防治茄子枯萎病的發生和危害。

參考文獻

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