引言
鹽酸曲馬多（TR）為非嗎啡類強效鎮痛藥，對各種原因造成的劇烈疼痛均具有顯著作用[1,2].在合適的劑量下，不會產生呼吸抑制作用，對血流動力學亦無顯著影響[3].
控釋制劑（controlled-releasepreparation1近零級）從制劑中釋放到作用部位而發揮療效的一類制劑鹽酸曲馬多制成控釋制劑，可有效延長作用時 間，保持較平穩的血藥 濃 度降低其 不良反應[4-6].本文以高效液相色譜法測定了自制的鹽酸曲馬多控釋片，并經過方法學考察，可以實現定性鑒別及含量測定[7].
1材料與方法
1.1儀器與試藥[8,9]高效液 相 色 譜 儀 （美 國Waters），檢 測 器 為UV-2487,工作站為Empower色譜工作站，柱溫控制箱（Waters）；紫外可見分光光度計（U-1901北京普析通用）；0.8μm微孔濾膜和0.45μm微孔濾膜（上海醫工院）；鹽酸曲馬多（311004石家莊制藥集團華盛制藥有限公司）；鹽酸曲馬多對照品（編號153806744）；甲醇為色譜純級，其他試劑均為分析純，鹽酸曲馬多口服控釋片實驗室自制.
1.2色譜條件[10,11]高 效 液 相 色 譜 儀：Waters泵：1500系 列HPLC泵；檢測器：UV-2487;工作站：Empower色譜工作站；流動相：取醋酸鈉18g,加冰醋酸9.8mL,再加水稀釋至1 000mL即得水相，再以水相∶有機相=65∶35加入甲醇，即得[醋酸-醋酸鈉緩沖液（pH4.5）]-甲醇（65∶35）；流速：1.0mL/min;色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠填充柱（C18柱）Phenomenex?150×4.60mm 5micro;柱溫30℃。
1.3檢測波長的測定方法取對照品鹽酸曲馬多，以流動相為溶劑，制成每1mL中含80μg的溶液，在200~300nm處以紫外可見分光光度計進行掃描，確定檢測波長.
1.4定性鑒別采用高效液相色譜法（HPLC）對所制得樣品進行定性鑒別.
1.5專屬性測定按處方量稱取空白輔料45mg入25mL量瓶，加入流動相，在超聲波清洗器中超聲處理30min,定容后過濾，濾液即為空白輔料樣品溶液.取鹽酸曲馬多對照品50mg,精密稱定，置于25mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，得對照品儲備液.用移液管吸取對照品儲備液2.5mL入10mL量瓶，用流動相定容即得對照品溶液.分別對空白輔料樣品溶液和對照品溶液進樣20μl,得圖譜，判斷空白輔料對含量測定是否有干擾.
1.6精密度測定取1.3中鹽酸曲馬多對照品溶液，連續進樣5次，每次20μl,得圖譜及峰面積，求RSD值，判斷儀器精密度是否良好.
1.7線性測定分別吸取1.3中對照品儲備液1.5、2.0、2.5、3.0和3.5mL入10mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，即得對照品系列溶液.分別取對照品系列溶液20μl進樣，每個樣重復一次，得圖譜及峰面積，以每個樣品的平均峰面積對濃度進行線性回歸，得回歸方程、標準曲線及相關系數r.
1.8穩定性測定取1.3中鹽酸曲馬多對照品溶液，分別在0、2、4、6及8h進樣20μl,每次重復進樣一次，得圖譜及峰面積.求RSD值，判斷鹽酸曲馬多在8h內是否穩定.
1.9回收率測定精密稱取10mg、12.5mg及15mg的鹽酸曲馬多對照品各三份，分別倒入25mL的量瓶中，加入處方量的輔料、適量的流動相分散均勻后，超聲振蕩30min后加流動相定容至刻度，搖勻后過濾，取續濾液20μl進樣，測定峰面積并計算回收率.
1.10重復性測定取制得的鹽酸曲馬多控釋片20片，研碎后取適量（相當于鹽酸曲馬多12.5mg），用流動相分散均勻后入25mL容量瓶，超聲處理30min后用流動相定容至刻度，搖勻后過濾，取續濾液20μl進樣.連續測定五次樣品的含量.
1.11含量測定取制得的鹽酸曲馬多控釋片20片，研碎后取適量（相當于鹽酸曲馬多12.5mg），用流動相分散均勻后入25mL容量瓶中，超聲處理30min后用流動相定容至刻度，搖勻后過濾，取續濾液20μl進樣.測定三批樣品的含量，計算，得到每片含量.
2 結果與討論
2.1檢測波長的確定[12]采用紫外分光光度計掃描鹽酸曲馬多的流動相溶液，結果如圖1所示.
可以發現，樣品分別在229nm和271nm波長處有最大吸收峰，該檢測器是紫外檢測器，故229nm處可能是溶劑峰的影響，鹽酸曲馬多的流動相溶液和水溶液在271nm處均有最大吸收，所以選擇271nm作為高效液相色譜儀的紫外檢測波長
2.2專屬性測定[13,14]對所制得鹽酸曲馬多樣品進行HPLC測定，結果如圖2所示.由圖2（a）和圖2（b）可知，HPLC圖譜中的樣品出峰時間與對照品出峰時間一致，TR≈8.0min.同時，與圖2（c）對比發現，鹽酸曲馬多的保留時間約是8min,而輔料在8min附近沒有峰，所以輔料對鹽酸曲馬多的含量測定沒有干擾。
2.3精密度測定對鹽酸曲馬多的HPLC測定方法的精密度進行考察，結果如表1所示.可以發現，6個平行樣品的峰面積RSD值為0.72%,表明該方法的精密度好.
2.4線性測定對鹽酸曲馬多的HPLC測定方法的線性進行考察，測得數據作圖，如圖3所示.經過計算可知，鹽酸曲馬多溶液0.3~0.7mg/mL濃度范圍內線性關系良好.回歸方程為A= 5 845 502C+83705,相關系數r=0.999 9.
2.5穩定性測定對鹽酸曲馬多的HPLC測定方法的穩定性進行研究，實驗結果如表2所示.可以發現，檢測結果的波動幅度較?。≧SD=0.70%），鹽酸曲馬多溶液在8h內穩定，即在測定時間范圍內穩定性較好.
2.6回收率測定[15]對鹽酸曲馬多的HPLC測定方法的回收率進行研究，結果如表3所示.可以發現，樣品的回收率在98% ~102%,RSD值 為0.99%,因 此，采 用HPLC法測定鹽酸曲馬多含量的方法是準確可靠的。
2.7重復性測定對鹽酸曲馬多的HPLC測定方法的重復性進行研究，得到RSD=1.18%,該方法的重復性較好，且結果準確.如表4所示.
2.8含量測定按照1.11項方法制備供試品及1.2項色譜條件，對鹽酸曲馬多含量測定，測得數據經計算得到每片含量，且RSD=0.24%.
如表5所示.按上述樣品處理方法和色譜條件測定，對鹽酸曲馬多標準品進行HPLC測定，保留時間為7.99min,如圖2（b）所示.所制得鹽酸曲馬多樣品進樣得，保留時間為8.02min如圖2（a）所示.色譜行為一致，且對測定無干擾.
3 結論
本文建立了鹽酸曲馬多口服控釋片的HPLC檢測方法.通過紫外測定確定了HPLC法的檢測波長，排出溶劑峰影響故在271nm有較強吸收，提高了檢出效果.選擇流動相[醋酸-醋酸鈉緩沖液（pH4.5）]-甲醇（65∶35），分離度大于2且時間短.同時增加了空白輔料的色譜圖，防止輔料干擾結果.試驗研究了HPLC測定方法的專屬性、精密度、線性、穩定性、回收率和重復性.試驗結果表明，選用HPLC法對鹽酸曲馬多口服控釋片進行檢測，準確高效，可滿足含量測定的需要.【圖略】
參考文獻
[1]劉艷紅，柯靜，鐘衛華，等.鹽酸曲馬多與高烏甲素術后自控鎮痛療效與安全性的meta分析[J].職業與 健康，2015,31（3）:366-369.
[2]王啟盛，呂亞莉，陳傳軍，等.鹽酸羥考酮緩釋片與鹽酸曲馬多緩釋片治療癌痛療效比較[J].中國 藥師，2014,17（12）:2 082-2 084.
[3]王芳，方浩，等.應用微透析技術研究鹽酸曲馬多在小鼠額葉皮質細胞外液中的藥動學[J].藥學學報，2013,48（3）:406-410.
[4]張向萍，李淑卿.鹽酸曲馬多鎮痛作用的研究概況[J].現代中西醫結合雜志，2005,14（14）:1 920-1 922.
[5]茹鮮·吾斯曼，王霞，阿米娜，等.鹽酸曲馬多緩釋片對中重度癌痛鎮痛的觀察106例分析[J].新疆醫學，2004,34（2）:22-24.
[6]蘇玉珠，盧秋桃，羅球珠，等.曲馬多制劑與臨床應用研究[J].基層醫學論壇，2011,15（34）:1 167-1 168.
[7]徐歡，邱穎姮.高效液相色譜法測定鹽酸曲馬多緩釋片中鹽酸曲馬多含量[J].中國藥業，2007,16（24）:35-36.
[8]魏紀魯，胡冠時.復方鹽酸曲馬多分散片處方及制劑工藝[J].中國醫院藥學雜志，2004,24（10）:627-629.
[9]崔瑞潔.鹽酸曲馬多微球緩釋片的制備及藥動學研究[J].中國現代應用藥學，2014,31（9）:1 089-1 093.
[10]王蘭，龔頻，張楠，等.頭孢拉定緩釋片的研制[J].陜西科技大學學報（自然科學版），2013,31（3）:93-96.
[11]王蘭，楊芳.高效液相色譜法測定川芎茶調丸中阿魏酸含量[J].現代中醫藥，2004（1）:60-62.
[12]盧曉陽，申屠建中，吳麗花，等.高效液相色譜法測定人血清中鹽酸曲馬多濃度[J].中國醫院藥學雜志，2004,24（6）：340-341.
