葡萄新品系“龍紫寶”為釀酒葡萄新品種，親本不詳?！褒堊蠈殹逼咸焉L勢健壯，在正常管理條件下，當年扦插的葡萄苗其新梢就能長到2 m以上，扦插后第2年即可結果，且果實品質優良?！褒堊蠈殹备禂盗慷?、抗寒、抗凍、抗旱能力強，并具有極強的抗霜霉病能力，在河北中北部地區可以自然越冬[1].

在此項研究中，主要以“龍紫寶”葡萄當年生枝條的腋芽為外植體進行組織培養，目的在于尋求建立高效、穩定的“龍紫寶”葡萄組培工廠化育苗技術體系。

1 材料與方法

以當年生“龍紫寶”枝條的腋芽為供試材料。

1.1 外植體誘導

選擇生長健壯的“龍紫寶”1年生枝條，將葉片剪下，枝條剪成5~6 cm長的小段，用洗滌靈水輕輕刷洗表面，注意不要破壞腋芽，刷洗完成后置于流動水中沖洗2 h左右。在無菌條件下用75%酒精浸泡莖段30 s,無菌水沖洗2遍，然后用0.1%升汞加幾滴吐溫的溶液浸泡莖段8 min,無菌水沖洗3遍[2].在無菌條件下切取腋芽接種于添加不同濃度KT（0.4、0.8、1.6、2.4 mg·L-1）和NAA（0.1、0.2 mg·L-1）的GS培養基上進行誘導培養。每個處理接種50瓶，每瓶1個腋芽，30 d后統計外植體誘導率[3].

1.2 組培苗增殖培養

以 GS 為 基 本 培 養 基 ,添 加 KT（0.6、1.2、1.8 mg·L-1）、NAA（0.05、0.10 mg·L-1）。將高1.5~2.5 cm 的單株無菌苗轉接入增殖培養基中培養，每個處理接種5瓶，每瓶10個嫩芽，40 d后統計增殖率。

1.3 培養條件

基本培養基中均加入35 g·L-1蔗糖、8.0 g·L-1瓊脂，pH 值 5.8.培養室溫度（23±2）℃，光照強度2 000~2 500 lx,光照時間 15 h·d-1.

2 結果與分析

2.1 外植體誘導

不同激素組合對外植體腋芽誘導的影響不同（表 1），3 號 培 養 基（GS+KT 0.8 mg·L-1+ NAA0.1 mg·L-1）的萌芽率最高，芽生長狀況也最好，其次是4號培養基。因此，“龍紫寶”葡萄的最適誘導培養基為GS+KT 0.8 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖35 g·L-1+瓊脂 8 g·L-1.

2.2 組培苗增殖

隨著KT濃度增加，葡萄組培苗的增殖倍數也隨之增加，但是當KT達到1.8 mg·L-1時，組培苗開始大量長出愈傷組織，增殖倍數降低，影響組培苗的正常生長（表2）。

對表 2 數據進一步做方差分析，結果表明，F0.01（2,24）=5.61,KT（F=163.08）、KT × NAA（F=20.76）的影響達到極顯著水平。說明 KT 是影響葡萄組培苗增殖的最主要因素，而NAA能夠促進增殖組培苗的高生長，并與KT存在交互作用，進而影響葡萄組培苗的增殖效果。由表2可知，最佳增 殖培養基是GS+KT 1.2 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗糖35 g·L-1+瓊脂 8 g·L-1,此時“龍紫寶”葡萄增殖芽多且生長健壯，底部愈傷組織數量較少。

3 結 論

以“龍紫寶”葡萄腋芽為外植體，嘗試對其進行誘導及增殖培養試驗，得到最佳誘導培養基為GS+KT 0.8 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖 35 g·L-1+瓊脂8 g·L-1,誘導萌芽率最高達到88%.最佳增殖培養基為 GS+KT 1.2 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+ 蔗糖35 g·L-1+瓊脂 8 g·L-1,增殖倍數最高達到8.7倍。上述試驗的成功，為進一步探討“龍紫寶”葡萄生根培養及工廠化快繁研究奠定了技術基礎。

參 考 文 獻：

[1] 王浩。葡萄新品系‘龍紫寶’越冬性研究[D].秦皇島：河北科技師范學院，2012:19-20.

[2] 曹孜義，劉國民。實用植物組織培養技術教程[M].蘭州：甘肅科學技術出版社，1999:43-44.

[3] 王艷輝，劉麗霞。 金葉復葉槭組培技術研究[J].遼寧林業科技，2014,（4）：44-45.