祖國醫學認為“久病血瘀”、“久病入絡為血瘀”[1].血瘀證是多種疾病的發病基礎或病變結果。表現為血脈不暢,血液壅阻于脈中或離經停積的病理狀態,在中醫辨證過程中氣虛血瘀證、氣滯血瘀證、寒凝血瘀證是常見的證型[2].近年來研究報道血瘀證相關臨床檢驗指標很多,有研究報道血瘀證患者血漿黏度、全血黏度、紅細 胞沉降 率、紅 細 胞 電 泳 時 間 等 指 標 升高[3].也有學者研究發現內皮素(ET)、血紅蛋白、一氧化氮(NO)等對血瘀證診斷有較高的價值[4-5]等。但是,有關氣虛血瘀證、氣滯血瘀證、寒凝血瘀證與臨床檢驗指標的關系文獻報道還沒有。為進一步探討中醫氣虛血瘀證、氣滯血瘀證、寒凝血瘀證與臨床檢驗指標之間的相關性,為中醫血瘀辨證提供新的內容和定量指標,以期用于指導中醫臨床辨證論治,提高中醫診療水平。研究者對中醫氣虛血瘀證、氣滯血瘀證、寒凝血瘀證患者和健康人各50例血樣進行血流變學、凝血指標、血脂指標以及ET、NO、心鈉素(ANP)、血清游離鈣(F-Ca2+)、C反應蛋白(CRP)等檢測分析,報道如下。
1資料與方法
1.1一般資料 按照氣虛血瘀證、氣滯血瘀證、寒凝血瘀證診斷標準,收集本院2014年1~6月門診患者病例3種證型各50例,病例選擇男性女性患者各占50%,其中年齡38~83歲,平均(55.3±8.9)歲。健康組50例,其中男女各占50%,均來自本院體檢中心健康人員,體征及實驗室檢查排除有血瘀證或其他慢性疾病,年齡45~55歲,平均(49.4±5.8)歲。
1.2證型分類方法 血瘀證的診斷參照北京血瘀證研究國際會議的標準[6]:(1)舌紫暗或有瘀斑瘀點;(2)典型澀脈或無脈;(3)痛有定處(或久痛、錐刺性痛或不喜按);(4)瘀血腹證;(5)癱積;(6)離經之血(出血或外傷疲血);(7)皮膚黏膜瘀斑、脈絡異常;(8)痛經伴色黑有血塊或閉經;(9)肌膚甲錯;(10)偏癱麻木;(11)瘀血狂躁;(12)理化檢查具有血液、循環瘀滯表現。說明:(1)具有以上任何一項可診斷為血瘀證;(2)各科血瘀證診斷標準另行制定;(3)有關兼證應注意整體辨治。氣虛血瘀證、氣滯血瘀證、寒凝血瘀證的診斷參照中華人民共和國國家標準中醫臨床診療術語證候部分[7].(1)氣虛血瘀證定義如下:“氣虛運血無力,血行瘀滯,以面淡而晦暗,身倦乏力,少氣懶言,疼痛如刺,痛處不移,舌質淡紫,或有紫斑,脈沉澀等為常見癥的證候”.(2)氣滯血瘀證定義如下:“氣機阻滯,血行不暢,以胸脅脘腹脹悶竄痛,偶有刺痛,或有痞塊、時散時聚,舌紫或有斑點,脈弦澀等為常見癥的證候”.(3)寒凝血瘀證定義如下:“寒邪凝滯氣機,血行瘀阻,以畏寒冷痛,得溫痛減,肢冷色青,婦女月經后期、痛經、經色紫暗夾塊,舌紫暗,苔白,脈沉遲而澀等為常見癥的證候”.
1.3檢 測 指 標 血 流 變 指 標:全 血 粘 度 (BV)、血 漿 粘 度(PV)、壓 積 (Hct)、紅 細 胞 聚 集 指 數 (RE)、紅 細 胞 沉 降 率(ESR)以及凝血相關指標:凝血酶原時間(PT)、部分活化凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)、血漿纖維蛋白原(Fib);血脂相關檢驗指標:三酰甘油(TG)、膽固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL)、載脂蛋白A1(apoA1)、載脂蛋白B(apoB);其他檢驗指標:ET、NO、ANP、F-Ca2+、CRP.
1.4樣本采集所有采集受試者于上午8:00~10:00空腹抽取肘靜脈血。(1)凝血相關檢測標本:抽取靜脈1.8mL注入含枸櫞酸鈉0.2mL的采血管內,馬上與抗凝劑輕輕搖勻,2500r/min離心10min分層,取上層血漿,1h內完成測定,檢測凝血指標PT、APTT、TT和FIB.(2)血流變學指標檢測標本:抽取靜脈3.6mL注入含肝素鈉抗凝劑管,馬上與抗凝劑輕輕搖勻,1h內完成測定,檢測BV、PV、Hct、RE、ESR.(3)血脂及其他相關指標:抽取靜脈5mL,不需做抗凝處理,于室溫下0.5~1.0h內離心,3 000r/min離心15min,留取上清液,-80℃低溫冰箱保存。
1.5儀器與試劑 采用北京眾馳偉業公司生產的全自動血流變測試儀ZL9600,美國貝克曼庫爾特公司生產的全自動凝血分析儀ACLTOP700,美國貝克曼公司生產的全自動生化分析儀AU2700,北京普朗公司生產的酶標分析儀DNM-9606.血液流變(全血黏度、血漿黏度、壓積、血小板聚集指數)清洗液試劑(白)批 號201401-201B01、清 洗 液 試 劑 (蘭)批 號201401-201L01,由 北 京 眾 馳 偉 業 廠 家 提 供。PT批 號N0720740、APTT批 號N05020070、TT批 號N1021713)、Fib批 號:N0429545,均由貝克曼庫爾特商貿有限公司提供。TG批號13-0529P、CHO批號13-0531P、LDL批號13-0424P、apoA1批號:13-0729P、apoB批號13-0701P,均由北京九強生物技術有限公司提供。血清游離鈣批號AUZ0671由貝克曼庫爾特實驗系統有限公司提供。CRP批號20150314,由上?;骺萍加邢薰咎峁┊a。NO(酶法)批號20130228,由南京建成生物工程研究所生產。ANP批號130220、ET批號130104,由北京北方生物技術研究所提供。所有試劑均在有效期內使用。
1.6檢測方法 儀器用廠家配套的校準品校準,各項目均采用有效的質量控制措施,嚴格按標準操作程序(SOP)操作。
1.7統計學處理 采用SPSS16.0統計軟件進行分析,計量資料均采用x±s表示,采用t檢驗,以P<0.05為差異具有統計學意義。
2結果
血瘀證辨證分型中的氣虛血瘀證、氣滯血瘀證、寒凝血瘀證及健康組與血液流變學指標、凝血指標、血脂指標等臨床檢驗指標存在一定相關性。見表1~4.
3討論
血液流變學的異常是血瘀證一個重要客觀指標,血瘀證的血液流變學 改變表現出血液的“黏”、“濃”、“凝”、“聚”的 特點[8-9].血液作為一種含有血細胞的懸浮液體系統,具有流動性和變形性的特點,全血黏度隨著切變率的增大而降低,隨著切變率的減小而增高。血漿黏度不隨著切變率的變化而變化,在一定條件下是一個常數。血漿黏度是影響全血黏度的重要因素之一,血漿黏度升高,全血黏度隨之相應升高,它的高低主要取決于血漿蛋白,尤其是纖維蛋白的濃度。而纖維蛋白是血液凝固的重要成分。
血瘀證時血流瘀阻,血液流變學發生變化,機體微循環凝血纖溶系統激活。這時血液流變學指標和凝血指標發生變化。
從表1來看,氣虛血瘀證、氣滯血瘀證、寒凝血瘀證各型血流變指標BV、RE、ESR較健康組有明顯升高。但是氣滯血瘀證升高最多,寒凝血瘀證次之,氣虛血瘀證各指標增高最少,差異有統計學意義(P<0.05)。氣滯血瘀證和氣虛血瘀證患者PV值無明顯變化,寒凝血瘀證PV升高明顯(P<0.05)??赡苁菣C體凝血系統激活,Fib水平升高所致。氣滯血瘀證和寒凝血瘀證Hct明顯增大,而氣虛血瘀證患者Hct變化不明顯,可能是氣虛久之導致血虛的緣故。
從表2來看,氣虛血瘀證、氣滯血瘀證患者和健康組對凝血指標無明顯的影響。寒凝血瘀證血漿Fib水平明顯升高,PT、TT、APTT均延長,與氣虛血瘀證、氣滯血瘀證及健康組比較差異有統計學意義(P<0.05)。從表3來看,氣虛血瘀證、寒凝血瘀證和健康組對血脂相關指標無明顯的影響。氣滯血瘀證患者TG、CHO、LDL、apoA1、apoB升高明顯,與氣虛血瘀證、寒 凝 血 瘀 證 及 健 康 組 比 較 差 異 有 統 計 學 意 義 (P<0.01)。從表4來看,血瘀證各型CRP水平較健康組有明顯升高。其中寒凝血瘀 證CRP水平高 于氣 滯 血 瘀 證 患 者 (P<0.05)。氣滯血瘀證患者的CRP水平高于氣虛血瘀證 患 者(P<0.05)。氣虛血瘀證、氣滯血瘀證患者的血清F-Ca2+指標與健康組比較無明顯變化。寒凝血瘀證患者血清F-Ca2+與氣虛血瘀證、氣滯血瘀證及健康組比較差異有統計學意義(P<0.05)。
正常生理狀態下,內皮細胞分泌ET和NO,ET收縮血管、正性肌力作用增強,而NO擴血管、抑制血小板聚集和黏附、防止血栓形成的作用受到抑制,機體處于高凝狀態。當血管內皮結構受損或功能紊亂時,體內亦可出現一系列凝血和纖溶失衡的連鎖反應,導致血流動力學的改變,出現血瘀證的臨床表現[10].本次實驗發現,氣滯血瘀證患者NO水平較健康組有明顯升高,差異有統計學意義(P<0.01)。寒凝血瘀證和氣虛血瘀證患者血中NO較健康組明顯降低,差異有統計學意義(P<0.01),與文獻[11]報道一致。
血瘀證患者ET和ANP水平正相關,ET刺激ANP釋放[12-13].這與本研究也相符。氣滯血瘀證患者ET和ANP水平較健康組有明顯降低,差異有統計學意義(P<0.05)。寒凝血瘀證和氣虛血瘀證患者血中ET和ANP水平較健康組明顯升高,差異有統計學意義(P<0.05)。
臨床檢驗指標是重要的微觀辨證指標[14].中醫證候的診斷與西醫實驗室檢查診斷結果殊途同歸[15].研究者通過分析氣虛血瘀證、氣滯血瘀證、寒凝血瘀證患者血流變指標(BV、PV、Hct、RE、ESR)、血凝指標(PT、APTT、TT、Fib)、血脂指標(TG、CHO、LDL、apoA1、apoB)以及ET、NO、ANP、F-Ca2+、CRP等,初步發現三者檢測結果存在明顯差別。它們值的變化與中醫血瘀證分型存在一定的關系。
本研究結果提示,在中醫理論的指導下,可以將現代醫學臨床檢驗結果融合到傳統醫學血瘀證辨證分型中,利用臨床檢驗指標便于量化的特點,以及中醫證候與臨床檢驗指標的內在聯系,為中醫證候的客觀化提供臨床依據,以便更好地指導中醫辨證治療。
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